<< Вернуться к списку статей журнала
Том 5 №3 2003 год - Нефрология и диализ
Исследование активности фермента 11β-гидроксистероиддегидрогеназы в почках крыс линий WAG и НИСАГ
Черкасова О.П.
Аннотация: 11β-гидроксистероиддегидрогеназа (11β-ГСД) - фермент, который осуществляет взаимопревращение кортизола и кортизона в организме человека и кортикостерона и 11-дегидрокортикостерона у крыс. Обнаружено несколько изоформ данного фермента. Первая изоформа (11β-ГСД1) катализирует преимущественно реакцию восстановления 11-дегидрокортикостерона в кортикостерон. Эта изоформа солокализована с глюкокортикоидными рецепторами и обнаружена в основном в печени, почках, легких и других тканях. Вторая изоформа (11β-ГСД2) солокализована с минералокортикоидными рецепторами и обнаружена в классических тканях-мишенях альдостерона (почки, кишечник, сосуды и др.). 11β-ГСД2 катализирует реакцию окисления, превращая кортикостерон в относительно неактивный 11-дегидрокортикостерон, тем самым предотвращая связывание глюкокортикоида кортикостерона с минералокортикоидным рецептором. Нарушение в активности этого фермента в почках приводит к возникновению и развитию различных видов гипертензии. Цель работы состояла в разработке метода определения активности 11β-ГСД и сравнительном анализе активности данного фермента в почках крыс с наследственной стресс-чувствительной артериальной гипертонией (линия НИСАГ) и нормотензивных крыс линии WAG. Активность 11β-ГСД определяли разработанным нами методом: гомогенат коры почки крысы инкубировали 1 час при 37 °С в присутствии 12 нМ кортикостерона, 1,5 мМ НАДФ в 0,1 М натрий-фосфатном буфере, рН 8,5. После добавления ацетонитрила и центрифугирования реакционную смесь анализировали микроколоночной высокоэффективной жидкостной хроматографией в градиенте ацетонитрила на сорбенте Силасорб С18 (5 мкм) с длиной волны детектирования 250 нм. Активность фермента выражали в нмоль 11-дегидрокортикостерона, образованного за 1 минуту из 1 грамма ткани (нмоль мин-1г-1). Кортикостерон и 11-дегидрокортикостерон в плазме крови крыс определяли разработанным нами методом с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии. Было получено, что активность 11β-ГСД в почках крыс линии НИСАГ в 1,5 раза выше таковой у крыс линии WAG и составляет 4,27 ± 0,43 и 2,86 ± 0,26 соответственно. При стрессе активность11β-ГСД несколько увеличивается у крыс линии WAG (3,49 ± 0,43) и практически не изменяется у крыс линии НИСАГ, оставаясь достоверно выше (4,15 ± 0,37). В плазме крови наблюдается достоверное снижение отношения кортикостерон/11-дегидрокортикостерон у крыс линии НИСАГ по сравнению с крысами линии WAG (2,90 ± 0,63 и 5,05 ± 1,05 соответственно). При стрессе происходит достоверное увеличение кортикостерона как у крыс линии НИСАГ, так и у крыс линии WAG, что приводит к увеличению отношения кортикостерон/11-дегидрокортикостерон в 4 раза у крыс линии НИСАГ и в 2,5 раза у крыс линии WAG. Таким образом, проведенное исследование показало существенные отличия в активности фермента 11β-ГСД в почках между крысами линии НИСАГ и крысами линии WAG как в исходном состоянии, так и при стрессе. Эти особенности функционирования 11β-ГСД могут вносить вклад в развитие стресс-зависимой артериальной гипертонии.
Для цитирования: Черкасова О.П. Исследование активности фермента 11β-гидроксистероиддегидрогеназы в почках крыс линий WAG и НИСАГ. Нефрология и диализ. 2003. 5(3):269. doi:
