Анализ экспрессии гена ангиотензин-превращающего фермента в почках гипертензивных крыс линии НИСАГ

Abstract

Для изучения стресса как фактора, провоцирующего развитие гипертензии, в Институте цитологии и генетики СО РАН была получена инбредная линия крыс с наследуемой стресс-чувствительной артериальной гипертонией (линия НИСАГ). Модель была подробно охарактеризована физиологически, а также с помощью некоторых молекулярно-генетических методов. Ранее проведенные исследования позволили предположить существование гена с сильным влиянием на формирование гипертензивного статуса в ответ на эмоциональный стресс у крыс линии НИСАГ, расположенного на 10-й хромосоме в локусе ангиотензин-превращающего фермента (АСЕ). Ангиотензин-превращающий фермент является одним из ключевых компонентов ренин-ангиотензиновой системы. Активность ангиотензин-превращающего фермента была измерена при использовании в качестве субстрата гиппурил-L-гистидил-L-лейцина с помощью микроколоночной высокоэффективной жидкостной хроматографии. Методом мультиплексной RT-PCR нами был проведен анализ относительного содержания мРНК гена АСЕ в почках крыс линии НИСАГ и нормотензивной линии WAG в контроле и после воздействия на животных иммобилизационного стресса. Было показано, что базальный уровень мРНК гена АСЕ в почках крыс линии НИСАГ в 2,7 раза выше, чем у линии WAG (р < 0,01). Под действием стресса не найдено достоверных изменений уровня мРНК гена АСЕ у крыс линии НИСАГ, тогда как у линии WAG происходит его достоверное увеличение в 2,2 раза (р < 0,05) до уровня мРНК гена АСЕ в почках крыс НИСАГ. При измерении активности ангиотензин-превращающего фермента в ткани почки была получена соответствующая динамика. У крыс линии НИСАГ регистрировалась повышенная активность фермента как в состоянии покоя, так и при стрессе по сравнению с нормотензивной линией WAG. Под действием стресса активность фермента у крыс линии WAG несколько увеличивалась, а у крыс линии НИСАГ не изменялась. Интересно отметить, что в эксперименте на крысах линий SHRSP и WKY, где сравнивался только базальный уровень мРНК гена АСЕ в почках, не удалось обнаружить каких-либо отличий (Fernandez-Alfonso M.S., Kreutz R., Zeh K., Liu Y., Ganten D., Paul M. Hypertension, 1994, 24: 280-286). Результаты предполагают существование различий в регуляции гена АСЕ у крыс WAG и НИСАГ. У гипертензивных крыс линии НИСАГ отмечается перманентное повышение экспрессии гена, кодирующего ангиотензин-превращающий фермент в ткани почки, что может вносить свой вклад в патогенез стресс-зависимой артериальной гипертонии. Работа поддержана грантами РФФИ № 01-04-49695 и № 02-04-48291.