К механизму дисфункции эритроцитов у больных хронической почечной недостаточностью, находящихся на гемодиализе

Аннотация

Общеизвестно, что уремия характеризуется существенными изменениями функциональной активности эритроцитов (ЭЦ) [Frober R., 1981; Inauen W., 1982; Kaji D., 1987; Mimic-Oka J., 1995; Galli F., 1999; Ly J., 2004]. Полагают, что одним из механизмов таких нарушений является структурная перестройка мембраны ЭЦ, в частности изменение содержания фосфатидилсерина на поверхности клетки [Bonomini M., 1982; 2004]. Экстернализация фосфатидилсерина является сигналом для распознания клеток как нежизнеспособных и уничтожения их макрофагами. Кроме того, такие эритроциты проявляют прокоагулянтные свойства, их количество прямо коррелирует с уровнем фрагмента протромбина, комплекса тромбин-антитромбин, D-димера [Bonomini M., 2005]. Однако механизм подобных изменений в мембране ЭЦ не ясен, имеющиеся данные немногочисленны и зачастую противоречивы. Цель настоящей работы - исследовать некоторые механизмы дисфункции ЭЦ у больных хронической почечной недостаточностью (ХПН), находящихся на программном гемодиализе. Материалы и методы исследования. Под наблюдением находились 25 больных с терминальной стадией ХПН, получающих гемодиализную терапию в отделении диализа ГМЛПУЗ ЧОКБ на аппаратах «А4008Е» («Фрезениус», Германия) 2 раза в неделю сеансами по 5 часов, Кt/v 1,37 ± 0,06. Кровь для исследований брали из артериального колена артерио-венозной фистулы до и после сеанса гемодиализа. Группой контроля служили практически здоровые лица - кадровые доноры областной станции переливания крови. ЭЦ получали центрифугированием цельной крови и отмывали в забуференном физиологическом растворе. Состояние мембран ЭЦ оценивали по способности ЭЦ к деформации и величине заряда на поверхности клеток. Деформабильность ЭЦ исследовали методом эктацитометрии. Определяли индекс деформабильности ЭЦ при напряжениях сдвига 10,5 Н/м2; 15,75 Н/м2; 28,0 Н/м2; 36,75 Н/м2; 47,25 Н/м2 [Bessis M. et al, 1980]. О величине отрицательного заряда на поверхности ЭЦ судили по показателям агрегации клеток с 0,5% раствором альцианового голубого [Halbhuber K.J., Geyer G., 1977; Bernard A.M. et al, 1988]. Процессы свободно-радикального окисления (СРО) в ЭЦ исследовали методом люминол-зависимой хемилюминесценции (ХЛ) на приборе «ХЛ-003» [Фархутдинов Р.Р., 1998]. В качестве индуктора свечения ЭЦ использовали Fe2+. Оценивали светосумму свечения и максимальную светимость. Результаты исследования и их обсуждение. Установлено, что у больных ХПН снижается (р < 0,05) деформабильность ЭЦ при всех скоростях сдвига (10,5-47,25 Н/м2). Причем, наиболее существенные изменения наблюдаются на средних и высоких скоростях сдвига (индекс деформабильности при сдвиге 36,75 Н/м2 составляет 0,207 ± 0,009; в контрольной группе 0,303 ± 0,004; р < 0,001). В то же время, показатели агрегации ЭЦ увеличиваются (скорость агрегации 1,61 ± 0,08%/мин.; в контроле 2,19 ± 0,12 %/мин; р < 0,001), что свидетельствует о прогрессивном уменьшении отрицательного заряда на поверхности клеток и существенных структурно-функциональных перестройках мембраны ЭЦ. Мы полагаем, что отмеченные изменения связаны с активацией процессов свободно-радикального окисления в ЭЦ. Действительно, показатели ХЛ ЭЦ статистически значимо возрастают (светосумма свечения 32,03 ± 5,39 у. е.•мин.; в контроле 5,23 ± 0,57 у. е.•мин; р = 0,003). Причем установлена отрицательная достоверная корреляция между процессами СРО, с одной стороны, и деформабильностью (R = -0,62; р < 0,05) и агрегацией ЭЦ (R = -0,76; р < 0,05) с другой. Процедура гемодиализа полностью восстанавливает деформабильность ЭЦ (индекс деформабильности при сдвиге 36,75 Н/м2 0,298 ± 0,004; р < 0,001). Показатели агрегации ЭЦ у 12 больных (48%) восстанавливаются полностью (скорость агрегации 1,43 ± 0,09%/мин.; р < 0,001), у 13 больных (52%) - не изменяются (скорость агрегации 1,85 ± 0,09; р > 0,05). Это позволяет констатировать только частичное восстановление заряда на поверхности ЭЦ. Выявлено, что после сеанса гемодиализа процессы СРО в ЭЦ снижаются, но не достигают значений контрольной группы (светосумма свечения 17,68 ± 4,93; р < 0,05). Выводы. 1) Установлено, что у больных хронической почечной недостаточностью до диализа снижена деформабильность и величина отрицательного заряда на поверхности эритроцитов. 2) Механизм указанных изменений связан с активацией процессов свободно-радикального окисления в эритроцитах. 3) Процедура гемодиализа уменьшает процессы свободно-радикального окисления в мембране эритроцитов и как следствие нормализует деформабильность и частично заряд на их поверхности.