Участие гемопоэтических С034(+)-клеток в регенерации клубочков у больных хроническим гломерулонефритом

Abstract

Одним из актуальных вопросов современной нефрологии является поиск новых патогенетически обоснованных и более эффективных методов лечения хронического гломерулонефрита (ХГН). Одним из таких методов может стать клеточная терапия с использованием стволовых клеток. На сегодняшний день уже показано, что трансплантированные стволовые клетки костного мозга участвуют в восстановлении клеток клубочков и канальцев после острого повреждения почки. К сожалению, ничего не известно об участии собственных гемопоэтических стволовых клеток в регенерации клубочков при ХГН у человека. В то же время говорить о целесообразности трансплантации этих клеток при ХГН можно будет только после получения ответа именно на этот вопрос. Цель исследования. Изучить, участвуют ли гемо-поэтические CD34(+)-клетки в процессах восстановления клубочков у больных ХГН, и если участвуют, то проанализировать зависимость появления этих клеток в клубочках почки от выраженности морфологических проявлений гломерулонефрита (воспалительной активности заболевания и выраженности склероза клубочков). Методы исследования. Исследования проведены на 64 нефробиоптатах больных различными клинико-мор-фологическими формами первичного гломерулонеф-рита. Для выявления гемопоэтических CD34(+)-клеток в клубочках использовали иммуногистохимическое окрашивание к CD31 (маркеру эндотелиальных клеток) и CD34 (маркеру эндотелиальных и гемопоэтиче-ских стволовых клеток). Для каждого нефробиоптата проводили гистоморфологическую оценку индекса воспалительной активности ХГН и индекса склероза клубочков, а также иммуногистохимическим методом изучали пролиферативную активность клеток клубочков (окрашивание к PCNA) и их миофибробластическую трансдифференцировку (окрашивание к а-ГМА). Выраженность экспрессии каждого маркера выражали в баллах по схеме: менее 15% клеток клубочков экспрес-сируют искомый антиген - 1 балл, 15-50% - 2 балла, 50-70% - 3 балла, 70-100% - 4 балла. Исследовали как минимум 5 клубочков и по результатам вычисляли среднее значение активности экспрессии CD34 и CD31 для каждого среза. Преобладание экспрессии СD34 над CD31 на 1 балл и более свидетельствовало о наличие CD34(+)/CD31(-)-клеток, рассматриваемых нами как гемопоэтические CD34(+)-клетки. Полученные результаты. Сравнительный анализ показал, что гемопоэтические CD34(+)-клетки в клубочках присутствовали в 35% случаев. Проанализировав связь между появлением CD34(+)/CD31(-)-клеток и степенью развития морфологических проявлений заболевания, выявили, что максимальное число нефробио-птатов с наличием гемопоэтических CD34(+)-клеток обнаруживается при индексе воспалительной активности ХГН до 4 баллов и индексе склероза клубочков до 2 баллов. Для того чтобы понять, почему так происходит, мы сопоставили участие в регенерации стволовых клеток с наиболее изученными механизмами регенерации почки - пролиферацией клеток клубочков и их миофибробластической трансдифференцировкой - и установили, что эти процессы максимально выражены у больных с индексом воспалительной активности более 4 и индексом склероза клубочков более 7 баллов. В связи с этим мы считаем, что развивающийся по мере прогрессирования заболевания склероз почечной ткани препятствует проникновению CD34(+)-клеток из циркулирующей крови в почку. Выводы 1.Гемопоэтические CD34(+)-клетки участвуют в регенерации клубочков при хроническом гломеруло-нефрите. 2.Участие CD34(+)-клеток в регенераторном ответе непосредственно зависит от морфологической активности ХГН, а именно оно максимально при минимальной и умеренной воспалительной активности заболевания (1-4 балла) и минимальном склерозе клубочка (1-2 балла). 3.При более выраженном воспалении и склерозе основную роль в регенерации играют процессы пролиферации и миофибробластической трансдифферен-цировки клеток клубочка.